შეზღუდვის მონელების პროდუქტი ადვილად შეინახება -20 C-ზე. 4 C-ზე კარგი იქნება, მაგრამ იმის უზრუნველსაყოფად, რომ არ არის აქტივობა და არ არის ვარსკვლავური აქტივობა. რეკომენდებულია მისი შენახვა -20 C ტემპერატურაზე.
როგორ ინახავთ მონელებულ დნმ-ს?
სცადეთ შეინახოთ გელის ნაჭერი მაცივარში ღამით, ან თუნდაც ნაჭერი ბუფერში გადნოთ და გაყინოთ -20°C ან -80°C ტემპერატურაზე. დნმ-ის დეგრადაცია მოხდება იმავე სიჩქარით და იმავე პირობებში, როგორც ხსნადი დნმ, ამიტომ გამოიყენეთ უფრო ცივი ტემპერატურა უფრო ხანგრძლივი შენახვისთვის.
რას ნიშნავს პლაზმიდის მონელება?
გაწმენდილი პლაზმიდური დნმ იჯესტირდება 1 ან მეტი შემზღუდავი ფერმენტით (REs) შერჩეული დნმ-ის ზოლის მკაფიო ნიმუშის მისაცემად, რომელიც ადვილად იხსნება ელექტროფორეზით. … როგორც წესი, შერჩეულია შეზღუდვის ფერმენტები, რომლებიც ჭრიან მრავალჯერადი კლონირების ადგილზე (MCS) და იწვევს დიაგნოსტიკურ შაბლონს 2-5 ადვილად ამოსახსნელი ზოლებით.
როგორ ინახავთ ხაზოვან პლაზმიდებს?
თუ თქვენ გაწუხებთ TE-ს ქვედა დინების ეფექტები, შეინახეთ დნმ უმაღლეს კონცენტრაციაზე და საჭიროების შემთხვევაში განზავდეს, ან გამოიყენეთ "დაბალი TE", რომელიც არის 10 მმ ტრისი/ 0.1 მმ EDTA. როდესაც დნმ ან რნმ სუფთაა, ის შეიძლება ინახებოდეს -20C ტემპერატურაზე მრავალი თვის განმავლობაში ყოველგვარი დეგრადაციის გარეშე.
რამდენ ხანს შეგიძლიათ შეინარჩუნოთ შეზღუდვა?
Pro-Tip გამოყენებისა და რეაქციაში დნმ-ის ოდენობიდან გამომდინარე, ინკუბაციის დრო შეიძლება მერყეობდეს 45 წუთიდან ღამით.დიაგნოსტიკური დიჯესტებისთვის, 1-2 საათიხშირად საკმარისია. კლონირებისთვის გამოყენებული >1 მკგ დნმ-ის მონელებისთვის რეკომენდებულია დამუშავება მინიმუმ 4 საათის განმავლობაში.
