შებრუნებული ტრანსკრიპტაზა პირველად ახდენს დნმ-ის დამატებითი ჯაჭვის ტრანსკრიფციას რნმ:დნმ ჰიბრიდის შესაქმნელად. შემდეგ, საპირისპირო ტრანსკრიპტაზა ან RNase H ანადგურებს ჰიბრიდის რნმ-ის ჯაჭვს. შემდეგ ერთჯაჭვიანი დნმ გამოიყენება როგორც შაბლონი ორჯაჭვიანი დნმ-ის (cDNA) სინთეზირებისთვის.
მოქმედებს საპირისპირო ტრანსკრიპტაზა დნმ-ზე?
მოლეკულური ბიოლოგია
კლასიკური PCR ტექნიკა შეიძლება გამოყენებულ იქნას მხოლოდ დნმ-ის ჯაჭვებზე, მაგრამ, საპირისპირო ტრანსკრიპტაზას დახმარებით, რნმ შეიძლება გადაიწეროს დნმ-ში, რითაც შესაძლებელია რნმ-ის მოლეკულების PCR ანალიზი. საპირისპირო ტრანსკრიპტაზა ასევე გამოიყენება mRNA-დან cDNA ბიბლიოთეკების შესაქმნელად.
შეიძლება თუ არა საპირისპირო ტრანსკრიპტაზას გამოყენება mRNA შაბლონად?
(ბ) მეორე, ფერმენტი საპირისპირო ტრანსკრიპტაზა სინთეზირებს დნმ-ის ძაფებს, mRNA მოლეკულების შაბლონებად გამოყენებით.
რა არის საპირისპირო ტრანსკრიფციის შაბლონი?
შებრუნებული ტრანსკრიპტაზა არის რნმ-დამოკიდებული დნმ პოლიმერაზა, რომელიც ახორციელებს დნმ-ის სინთეზის კატალიზებას შაბლონად RNA. საბოლოო პროდუქტი ცნობილია როგორც დამატებითი დნმ (cDNA).
იყენებს თუ არა საპირისპირო ტრანსკრიპტაზა დნმ პრაიმერს?
შებრუნებული ტრანსკრიპტაზას ფერმენტები (RT) გარდაქმნის ერთჯაჭვიანი რეტროვირუსული რნმ-ის გენომებს ორჯაჭვიან დნმ-ად. RT ფერმენტს შეუძლია გამოიყენოს როგორც რნმ-ის, ასევე დნმ-ის პრაიმერი, პირველი გამოიყენება ექსკლუზიურად მინუს- და პლუს-ჯაჭვის სინთეზის დაწყებისას.
