გასულ წლებში კორიელმა გამოიყენა ყველა სითბოს ინაქტივირებული შრატი მისი უჯრედული კულტურებისთვის ახალშობილ ხბოს შრატში ნაპოვნი კომპლემენტის ცილის ინაქტივაციისთვის. ვინაიდან ჩვენ გადავედით ნაყოფის მსხვილფეხა რქოსანი შრატით, აღმოვაჩინეთ, რომ სითბოს ინაქტივაცია აუცილებელი არ არის უჯრედების უმეტესობისთვის.
რამდენ ხანს ათბობთ ინაქტივაციის FBS?
შემდეგი პროტოკოლი შემოთავაზებულია ნაყოფის მსხვილფეხა რქოსანი შრატის (FBS) სითბოს ინაქტივაციისთვის. FBS თბება 56±2°C-მდე 30±2 წუთის განმავლობაში აჟიტირებულ წყლის აბაზანაში. სითბოს ინაქტივაცია (HI) – პროცესი, რომლის დროსაც FBS ინახება 56±2° ტემპერატურაზე 30±2 წუთის განმავლობაში.
რატომ არის საჭირო სითბოს ინაქტივაცია FBS-სთვის გამოყენებამდე?
FBS-ის საერთო მკურნალობა არის სითბოს ინაქტივაცია, სადაც FBS თბება 56°C-ზე 30 წუთის განმავლობაში წყლის აბაზანაში პერიოდული შერხევით. მიზანია ინაქტივაცია კომპლემენტის სისტემის ნებისმიერი კომპონენტი, რომელიც იმყოფება FBS [24] და უჯრედების ზრდის სხვა პოტენციური უცნობი ინჰიბიტორები.
რატომ გჭირდებათ ინაქტივირებული შრატის გაცხელება?
სითბოს ინაქტივაციის მიზანია გაანადგუროს კომპლემენტის აქტივობა შრატში, პროდუქტის ზრდის ხელშემწყობ მახასიათებლებზე ზემოქმედების გარეშე. კომპლემენტის აქტივობის ამოღება შრატიდან არ არის საჭირო უჯრედული კულტურების უმეტესობისთვის, მაგრამ შეიძლება საჭირო იყოს კულტურებისთვის, რომლებიც მგრძნობიარეა კომპლემენტის აქტივობის მიმართ.
როგორ ინახავთ სითბოს ინაქტივირებული FBS?
დაიცავით გალღობილი FBS და სხვა შრატები უსაფრთხო მაცივრით დაშენახვა. დროულად გამოიყენეთ გადნებული შრატი. თხევადი FBS და სხვა შრატი შეიძლება ინახებოდეს მაცივარში (2-დან 8 °C-მდე) ოთხ კვირამდე.
