შეგიძლიათ ასევე მოაცილოთ თქვენი ნიმუში ულტრაფილტრაციით წინა მოცულობის 1 მეათედამდე, რომელიც კვლავ განზავდეს და გაიმეოროთ UF ნაბიჯი. მარილის გაწმენდის საუკეთესო მეთოდია გამფხვიერება გელის ფილტრაციით 50 მმ ბუფერის წინააღმდეგ, ვიდრე ულტრაფილტრაცია (კლასიკური, არა ცენტრიდანული)..
რა არის მარილის გაწმენდა ცილების გაწმენდაში?
დამალვა გამოიყენება პროტეინის ხსნარებიდან მარილების მოსაშორებლად, ფენოლის ან ნუკლეინის მჟავებიდან არაინკორპორირებული ნუკლეოტიდები ან ჭარბი ჯვარედინი ან ეტიკეტირების რეაგენტები კონიუგირებული ცილებიდან..
როგორ ასუფთავებთ ცილებს?
ცილების ნაყარი გაწმენდისას, ცილების იზოლირების საერთო პირველი ნაბიჯი არის ნალექი ამონიუმის სულფატით (NH4) 2SO4. ეს ხდება ამონიუმის სულფატის მზარდი რაოდენობის დამატებით და ნალექის ცილის სხვადასხვა ფრაქციების შეგროვებით. შემდგომში, ამონიუმის სულფატის ამოღება შესაძლებელია დიალიზის გამოყენებით.
როგორ იყენებთ ბუფერულ გაცვლის ცილებს?
თუმცა,
ბუფერის გაცვლა ხორციელდება პირველი დაბალანსებითსვეტის ფისით ბუფერთან, რომელშიც უნდა დასრულდეს ნიმუში. ორივე შემთხვევაში, ბუფერული კომპონენტები, რომლებიც ატარებენ ნიმუშს. სვეტი შეიცვლება ხსნარით, რომლითაც სვეტი წინასწარ არის დაბალანსებული.
ქვემოჩამოთვლილი ქრომატოგრაფიის რომელი ტექნიკის გამოყენებაა შესაძლებელი ცილების მარილის მოსაშორებლად?
როგორც ზემოთ აღინიშნა, გელის ფილტრაცია შეიძლება ეფექტურად იქნას გამოყენებული პროტეინისთვისმარილის მოცილება და მიიღწევა გელის ფილტრაციის სვეტის პირველი დაბალანსებით წყლით. თუმცა, ბუფერული გაცვლა მიიღწევა ჯერ სვეტის ფისის დაბალანსებით სამიზნე ბუფერთან.
