ძალიან მნიშვნელოვანია იცოდეთ, რომ Western blot-ით მიღებული მონაცემები, როგორც წესი, ნახევრად რაოდენობრივად ითვლება. ეს იმიტომ ხდება, რომ ის უზრუნველყოფს ცილის დონის შედარებით შედარებას, მაგრამ არა რაოდენობის აბსოლუტურ საზომს.
ვესტერნი ბლოტი თვისებრივია თუ რაოდენობრივი?
Western blot არის სანდო რაოდენობრივი მეთოდი მხოლოდ იმ შემთხვევაში, თუ განიხილება ნიმუშის თვისებები და მთლიანობა, ანტისხეულების სპეციფიკა სამიზნე ცილაზე და ჩატვირთვის პროტოკოლები. დეტალებზე ფრთხილად ყურადღების მიღებით, შეგიძლიათ თავიდან აიცილოთ გავრცელებული შეცდომები და თავიდან აიცილოთ Western blot მონაცემების არასწორი ინტერპრეტაცია.
რა ტიპის მეთოდია western blot?
ვესტერნ ბლოტი არის ლაბორატორიული მეთოდი, რომელიც გამოიყენება ცილის სპეციფიკური მოლეკულების გამოსავლენად ცილების ნარევიდან. ეს ნარევი შეიძლება შეიცავდეს ყველა ცილას, რომელიც დაკავშირებულია კონკრეტულ ქსოვილთან ან უჯრედის ტიპთან.
შეუძლია თუ არა ვესტერნ ბლოტს რაოდენობრივი განსაზღვრა?
Western blots გამოვლენილია ანტისხეულებით, რომლებიც სპეციფიკურიასამიზნე ცილისთვის, რომლებიც ცნობილია როგორც პირველადი ანტისხეულები. … თუმცა, ასევე შესაძლებელია გამოვიყენოთ Western blotting ნიმუშებში ცილების ზუსტი რაოდენობრივი განსაზღვრის უზრუნველსაყოფად, რათა შეფასდეს ცვლილებები ცილის ექსპრესიის დონეზე (2).
შეუძლია ვესტერნ ბლოტი ცილების რაოდენობრივ განსაზღვრას?
უჯრედების ლიზისის შემდეგ მნიშვნელოვანია განისაზღვროს ნიმუშის მთლიანი ცილის კონცენტრაცია. ნიმუშის ზუსტი რაოდენობა საშუალებას მოგცემთ ჩატვირთოთპროტეინის სათანადო რაოდენობა თითოეულ ზოლში.
