შეათავსეთ ჭურჭელი ოთახის ზომიერ ტემპერატურაზე 2-3 წუთის განმავლობაში . მყარად მიბმული უჯრედები შეიძლება სწრაფად განადგურდეს 37 °C ტემპერატურაზე. დააკვირდით უჯრედებს მიკროსკოპის ქვეშ. მოწყვეტილი უჯრედები მიკროსკოპის ქვეშ მომრგვალებული და რეფრაქციული ჩანს.
რა მოხდება, თუ უჯრედების ტრიფსინიზაციას ძალიან დიდხანს ახდენთ?
უჯრედების ინკუბაცია ძალიან მაღალი ტრიპსინის კონცენტრაციით ძალიან დიდი ხნის განმავლობაში დააზიანებს უჯრედის მემბრანებს და კლავს უჯრედებს. თუ არ ხართ დარწმუნებული ტრიპსინის გამოსაყენებელ კონცენტრაციაში, გამოიყენეთ დაბალი კონცენტრაცია.
როგორ ახდენთ უჯრედების ტრიფსინიზაციას?
უჯრედები შეიძლება ხელახლა შეჩერდეს უჯრედის სუსპენზიის ნაზად პიპეტირებით, რათა დაშალოს გროვა. შემდგომი განზავების გაკეთება შესაძლებელია, საჭიროების შემთხვევაში, უჯრედების დათვლისა და/ან სუბკულტურებისთვის.
რამდენი დრო სჭირდება უჯრედების მიმაგრებას?
პირველი უჯრედები მიმაგრებულია უკვე 3-5 წთ შემდეგ! ჩემი გამოცდილებით, EC-ების უმეტესობა მიმაგრებული იყო 10-20 წუთის შემდეგ. მაგრამ რაც უფრო მეტხანს ელოდებით მით უფრო მყარია დანართი.
საზიანოა უჯრედების ტრიფსინიზაცია ზედიზედ ორი დღე?
დიახ, ეს საზიანოა, თუ უჯრედების განუწყვეტლივ ტრიფსინიზაციას ახდენთ გაყოფიდან 24 საათის შემდეგ. მიზანშეწონილია გაყოფის გაკეთება 48 საათის გაყოფის შემდეგ. … თქვენ შეგიძლიათ შეინარჩუნოთ უჯრედები მანამ, სანამ მორფოლოგია არ გახდება კარგი (ეს დამოკიდებულია თქვენი უჯრედის ტიპზე, ზოგიერთ უჯრედს შეუძლია 80 პასაჟამდე გაზარდოს, ზოგი კი 10-მდე).
